Das LuLISA-Forschungsprojekt besteht in der Entwicklung von ho | Arm Me Against Uni(n)Formation

Das LuLISA-Forschungsprojekt besteht in der Entwicklung von hochsensitiven serologischen Tests, die an einen hohen Durchsatz angepasst sind, für lokale, regionale oder nationale Kohortenstudien und epidemiologische Überwachung. Es wird derzeit am Institut Pasteur als eine der Referenzmethoden zur Überwachung des Verlaufs der Herdenimmunität gegen die Covid-19-Krankheit in Zusammenarbeit mit Santé publique France und mehreren Krankenhäusern in verschiedenen Departements in Frankreich eingesetzt.
Der LuLISA (Luciferase-Linked ImmunoSorbent Assay) basiert auf der Herstellung eines Proteins, das im Tandem ein Fragment von Lama- oder Alpaka-Antikörpern exprimiert, die in der Lage sind, ein spezifisches Protein (Immunglobuline eines Patienten im Falle der Serologie oder virale Proteine im Falle des Virusnachweises) mit einer Shrimp-Luciferase zu binden, einem Enzym, das in der Lage ist, in Gegenwart eines synthetischen Substrats sehr effizient Licht zu emittieren. Die Menge des emittierten Lichts (Photonen pro Sekunde) ist proportional zur Menge der fixierten Lama-Antikörper. Der LuLISA quantifiziert daher Patienten-Immunglobuline oder virale Proteine, die mit ihren spezifischen immobilisierten Targets verbunden sind, um sie am Boden eines Röhrchens, einer Plattenvertiefung, eines Streifens oder auf einem Mikrobead einzufangen. LuLISA misst eine Reaktionsrate, die durch die Anzahl der pro Sekunde detektierten Photonen angegeben wird und unterscheidet sich von ELISAs, die die Akkumulation eines farbigen oder fluoreszierenden Reaktionsprodukts messen. Luziferasen sind häufige Enzyme in marinen Arten des Abgrunds (Kieselalgen, Nesseltiere, Quallen, Garnelen, Fische), seltener in terrestrischen Arten (Glühwürmchen, Käfer, Mückenlarven, Pilze). Regelmäßig werden neue Glühwürmchen entdeckt, und einige produzieren intensivere Lichtemissionen, oft blau, manchmal grün, orange oder rot, wenn sie mit fluoreszierenden Proteinen kombiniert werden. Die bekannten Luziferasen, die die höchste Anzahl von Photonen pro Sekunde produzieren, stammen von der Tiefseegarnele Gaussia princeps und neuerdings auch von Oplophorus gracilirostris. Der Einsatz von Luciferasen ist in Forschungslaboratorien weit verbreitet, in diagnostischen Anwendungen jedoch noch selten. Synthetische Substrate sind für den industriellen Einsatz nach wie vor zu teuer und trotz der Reduktion des Enzyms auf die katalytische Domäne allein und der Optimierung seiner Aktivität bleibt das Enzym fragil, selbstzerstörerisch und neigt zur Adsorption an Oberflächen.